2003年，在校期间出演中央戏剧学院青年女导演姬沛执导的话剧《安妮日记》，饰演密普。
2005年，参演饶晓志执导的首部公演话剧作品《我贵姓？》。同年参演戴鹏飞执导的首部幽默情景话剧《自我感觉良好》，在剧中饰贾美女。
2006年，参演精品时尚话剧《今年过节不收礼》。同年与濮存昕、陶虹主演易卜生创作的话剧《建筑大师》，该剧是第二届中国国家话剧院国际戏剧季“永远的易卜生”的开幕大戏。同年开始出演开心麻花系列舞台剧，在话剧《疯狂的石头》中客串角色。
2007年，主演话剧《谁都不许笑》，饰演苏菲，还参演话剧《满城就这一棵树》、《暗恋紫竹园》。
2008年，主演开心麻花微笑系列话剧《倒霉阿翔》、《甜咸配》。
2009年，与曹扬、包贝尔主演舞台剧《江湖学院》。还出演了话剧《索马里海盗》。
2010年，在孙红雷、林志玲、黄海波主演，李蔚然执导的喜剧电影《决战刹马镇》中饰演面饼老婆。在同年上映的喜剧电影《爱情维修站》中饰演风情万种的女孩橙橙。同年在湖南卫视元宵喜乐会上与何炅合作小品《超幸福鞋垫》大获好评，被媒体评为“女版郭德纲”。
2011年，在曾黎、刘蓓主演的《单亲妈妈的苦涩浪漫》中饰演米宝湘。同年在黄小蕾、那威、姜超主演的轻喜剧《喜事连连：剩男相亲记》中饰演陶燕。
2012年，出演赵晨阳导演，李小璐、任重、马苏主演的电视剧《AA制生活》饰演梁碧华，一改喜剧路线，走知性职场女性路线。同年与柳岩合作第一部水果剧《香瓜七兄弟》。另外，主演开心麻花系列爆笑舞台剧《乌龙山伯爵》、《夏洛特烦恼》。还参加了湖南卫视《百变大咖秀》，
在节目中扮演过雪村、梅艳芳、郭富城。
2013年，首次参加央视蛇年春晚，与沈腾合作小品《今天的幸福2》，饰演马冬梅。在张庭、冯远征、李明启主演的《男媒婆》中饰演莎莎。同年在姜武、颜丙燕主演的《伙伴夫妻》中饰演韩凌。参演梁丹妮、吴越主演的《工人大院》。在《杨光的夏天》中饰演响红。参加深圳卫视《年代秀》节目。
2014年，与沈腾主演央视春晚小品《扶不扶》，参加了安徽卫视的《非常静距离》。在容祖儿、钟欣桐、蔡卓妍主演电影《蹴鞠》中饰演谷一哥。
2014年11月，马丽在四川站录制《囍从天降》节目时产生高原缺2015年1月25日，央视春晚官方确认马丽加盟2015年央视羊年春晚语言类节目。
2015年02月17日，参加2015年中央电视台春节联欢晚会，表演小品《投其所好》。9月参演年代传奇大戏《战金岭》。同年在由闫非、彭大魔执导，沈腾和马丽主演的喜剧电影《夏洛特烦恼》中饰演马冬梅。
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